大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp
来源:学生作业帮 编辑:灵鹊做题网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/28 12:42:47
大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp
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没连进去呗 可能是最初的PCR就没扩增出来你要的条带 调整下退火温度 或者直接连T载体测序 或者换对引物
再问: 直接连T载体测序,这个怎么弄?引物是别人设计好的,所以很纠结。 我们拿菌液提质粒有,只是不很多。
再答: 提质粒有说明不了问题啊 质粒自连了也会长的 就是直接拿PCR跑胶回收产物连接T载体 T载体没有的话测序公司应该有卖 或者就是按下面说的连接完酶切验证 还是应该把条件改改
再问: 直接连T载体测序,这个怎么弄?引物是别人设计好的,所以很纠结。 我们拿菌液提质粒有,只是不很多。
再答: 提质粒有说明不了问题啊 质粒自连了也会长的 就是直接拿PCR跑胶回收产物连接T载体 T载体没有的话测序公司应该有卖 或者就是按下面说的连接完酶切验证 还是应该把条件改改
大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp
菌落PCR有关问题?我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带?
大片段的RT-PCR现在在做RT-PCR,目的片段5500多bp,用什么样的反应体系和条件能P出来啊?..希望知道或做过
PCR扩增目的基因以后,怎么用琼脂糖电泳回收及纯化呢?希望高手指教!
革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带.
转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?
关于PCR产物酶切要构建一个载体目的基因PCR回收后做双酶切应该做多大的体系50 or 100?各种成分为多少?望大家不
菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,
菌落pcr是否可以直接扩增基因组上的目的基因?单菌落需要特殊处理吗
对PCR扩增后的目的基因如何进行提取
怎么筛选目的基因,做PCR验证?
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急